Спектрометр Edinburgh серии LifeSpec II
Edinburgh LifeSpec II – компактный, высокоэффективный спектрометр для измерения времени жизни флуоресценции, предназначенный для использования вместе с импульсными и пикосекундными лазерами с высокой частотой повторения импульсов. Система представляет собой полностью автоматизированное решение, сочетающее в себе аппаратные и программные средства для выполнения фундаментальных исследований и применения в ходе стандартного лабораторного анализа.
Описание
В Edinburgh LifeSpec II используется технология счета одиночных фотонов с временной корреляцией (TCSPC) для точности измерений времени жизни флуоресценции. Его оптика с нулевой временной дисперсией задает стандарты технических параметров при измерении сверхбыстрых распадов.
Для Edinburgh LifeSpec II предусмотрен субтрактивный двойной монохроматор, который обеспечивает нулевую временную дисперсию спектрометра и позволяет прибору выполнять измерения времен жизни флуоресценции до 5 – 10 пс.
Расширенная версия программного обеспечения управляет всеми программами, а также анализирует предварительные данные. С помощью реконволюции программы выполняют достоверные измерения времени жизни флуоресценции до одной десятой функции срабатывания прибора.
Режимы сбора данных варьируют от данных по распадам времени жизни флуоресценции и спектров с временным разрешением до данных автоматических измерений анизотропии с временным разрешением и автоматических температурных карт.
Edinburgh LifeSpec II в стандартной конфигурации оснащен одним детектором. Можно добавить дополнительные детекторы. Для работы Edinburgh LifeSpec II требуется, по меньше мере, один пикосекундный импульсный диодный, импульсный LED, суперконтинуумный или титан-сапфировый лазер (с подходящим генератором импульсов).
Основная схема
Полный комплект спектрометра Edinburgh LifeSpec II включает оптический спектрометр, модуль питания и компьютер с картой сбора данных, TCC900. В стандартной конфигурации в Edinburgh LifeSpec II предусмотрен один выбранный источник света и один детектор. Систему можно рас-ширить с помощью дополнительных источников, детекторов, поляризаторов, охладителей проб и волоконной оптики. Некоторые из упомянутых вспомогательных средств могут быть устанавле-ны только на заводе-изготовителе. Основной блок Edinburgh LifeSpec II регулируется по высоте, чтобы оптическая плоскость располагалась на расстоянии 130–180 мм от поверхности стола.
Возможности измерения и анализа
Режимы сбора данных
• Сбор данных по флуоресцентному распаду
• Спектры флуоресценции с временным разрешением
• Квазистационарные спектры (с коррекцией спектра)
• Автоматические измерения анизотропии с временным разрешением (с дополнительными поляризаторами)
• Автоматические карты температуры (с дополнительным криостатом или держатель проб Пельтье с охлаждением)
Режимы анализа данных
• 4-экспоненциальное приближение с фоном, смещением, реконволюцией (на базе метода Левенберга-Марквардта)
• Мультиэкспоненциальное приближение анизотропии флуоресценции (только приближения хвостовой части)
Усовершенствованный анализ данных (дополнительно)
• 4-экспоненциальное приближение с фоном, смещением, реконволюцией; начальные оценки не требуются (основано методе собственной разработки)
• Анализ распределения времен жизни с сеткой 200 времен жизни и без предположительных форм распределения
• Анализ партии
• Глобальный анализ
• Кинетика Ферстера
• Приближение мицеллярного демпфирования
• Расширенный анализ экспотенциальных компонентов
• Усовершенствованная кинетика анизотропии флуоресценции с реконволюцией
Модули
Камера для проб
В Edinburgh LifeSpec II предусмотрена большая камера для проб, позволяющая с легкостью размещать множество различных держателей. К ним относятся держатели для одной кюветы, держатели для нескольких проб, фронтальные держатели для пленочных/сыпучих/порошкообразных проб, волоконные насадки, держатели для проб с температурной компенсацией и криостаты.
Субтрактивный двойной монохроматор
Нулевая временная дисперсия на оптическом пути необходима для выполнения точных измерений в нижней пикосекундной временной шкале. Традиционные монохроматоры предусматривают временные сдвиги и уширение импульса, обусловленные задержками распространения сигнала из-за размера решетки. В новой конструкции Edinburgh LifeSpec II используются два взаимодействующих монохроматора с противоположными характеристиками уширения импульса. Это устраняет временные сдвиги и временную дисперсию, а также увеличивает отклонение рассеянного света. При таком методе источники ошибок в показаниях прибора сокращаются, и измерения и анализ времен жизни можно осуществлять с большей точностью.
Поляризаторы с компьютерным управлением
Автоматические держатели поляризаторов с компьютерным управлением используются на пути возбуждения и пути эмиссии, чтобы обеспечивать работу дополнительных поляризаторов Глана-Томпсона. Поляризатор возбуждения может не потребоваться, если эмиссия лазера поляризируется естественным путем, как в случае с титан-сапфировым или пикосекундным импульсным диодным лазером. Линейно поляризированные возбуждение и эмиссия необходимы для измерений анизотропии флуоресценции. Тем не менее, даже в случае с точными распадами флуоресценции (релаксация энергии) поляризаторы могут потребоваться для устранения ротационных артефактов, которые налагаются на распад флуоресценции (измерения «магического угла»).
Подписи на рисунке: Second entry port for supercontinuum/Ti:Sapphire laser - Второе входное отверстие для суперконтинуумного лазера/титан-сапфирового лазера, Attenuator - Аттенюатор, Shutter - Клапан, Optional detector - Дополнительный детектор, Detector - Детектор, Optional excitation polarizer - Дополнительный поляризатор возбуждения, Sample position - Позиция образца, Emission polarizer - Поляризатор эмиссии, Monochromator - Монохроматор.
Источники света и детекторы
Спектрометр Edinburgh LifeSpec II можно использовать со всеми современными импульсными источниками с высокой частотой повторения, такими как пикосекундные импульсные диодные и LED-лазеры, суперконтинуумные «белые» пикосекундные импульсные и фемтосекундные титан-сапфировые лазеры.
Стандартный Edinburgh LifeSpec II снабжен регулируемым приемным фланцем для пикосекундных импульсных диодных лазеров (серия EPL) и УФ-LED (серия EPLED).
Суперконтинуумный лазер может быть дополнен специальным комплектом для выбора длины волн, который с помощью компьютерного управления позволяет выбирать длину волн и ширину спектральной полосы. В комплекте также предусмотрен интегрированный и оптимизированный детектор запуска синхронизации лазера.
Также для возбуждения проб может использоваться излучение титан-сапфировых лазеров с удвоением/утроением частоты и уловитель импульсов. Детектор запуска предусмотрен как дополнительное устройство.
Минимальное измеряемое время жизни зависит от скорости детектора и ширины импульсов пикосекундного импульсного источника света. С помощью числовой реконволюции из данных можно выделить времена жизни равные одной десятой от аппаратной функции системы. В таблице ниже показаны значения временного разрешения, которые можно получить с помощью Edinburgh LifeSpec II с другим источником света – сочетанием детекторов. Минимальное измеряемое время жизни рассчитывается путем деления цифры на десять.
Детекторы
Диапазон волн | Ширина показаний детектора |
Темновая скорость |
|
Высокоскор. синий ФЭУ | 230 - 650 нм | 250 пс | < 100 Па*с |
Высокоскор. красный ФЭУ | 230 - 850 нм | 250 пс | < 100 Па*с |
МКП-ФЭУ | 230 - 850 нм | < 25 пс | < 10 Па*с |
БИК-ФЭУ-1700 (LN2) | 300 - 1700 нм | 800 пс | < 100 000 Па*с |
БИК-ФЭУ-1700 (TE)* | 950 - 1700 нм | 400 пс | < 100 000 Па*с |
*Версия БИК-ФЭУ с охлаждением не может выполнять прямые измерения функции срабатывания прибо-
ра ниже 950 нм.
Функция срабатывания прибора (IRF)
Титан-сапфир. лазер |
Пикосек. импульс. диод. лазер (EPL) |
Пикосек. импульс. СИД (EPLED) |
Суперконтинуум. белый лазер |
|
Высокоскор. синий ФЭУ | < 250 пс | < 300 пс | < 1 нс | < 300 пс |
Высокоскор. красный |
< 250 пс | < 300 пс | < 1 нс | < 300 пс |
МКП-ФЭУ | < 50 пс | < 130 пс | < 1 нс | < 300 пс |
БИК-ФЭУ-1700 (LN2) | < 800 пс | < 800 пс | < 1,5 нс | < 800 пс |
БИК-ФЭУ-1700 (TE)* | < 400 пс | 450 пс | < 1 нс | < 450 пс |
*Версия БИК-ФЭУ с охлаждением не может выполнять прямые измерения функции срабатывания прибо-
ра ниже 950 нм.
Минимальное восстанавливаемое время жизни (разрешение времени жизни) составляет примерно одну десятую функции срабатывания прибора после числовой реконволюции.
Технические спецификации
Конфигурация оптики: 90° между путем луча возбуждения и эмиссии
Режим работы: Счет одиночных фотонов с временной корреляцией
Диапазон времен жизни: 5 пс – 50 µс (в зависимости от выбора источника и детектора)
Механический спектральный диапазон: 200 нм – 900 нм (стандарт), 800 нм – 2000 нм (дополнительно для фотоэлектронных умножителей ИК)
Полоса пропускания спектра: 0 нм – 60 нм (с компьютерным управлением)
Временная дисперсия: Нулевая (незначительная)
Ослабление пучка лазерного излучения: 4 порядка возрастания, с непрерывной регулировкой (с компьютерным управлением)
Программное обеспечение спектрометра: F900 для Windows®, полный пакет программ для сбора данных и анализа данных по времени жизни.